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大鼠ELISA試劑盒的組成結(jié)構(gòu)及檢測(cè)條件
2023-08-29佰利萊生物教您選購(gòu)大鼠ELISA試劑盒后需注意哪些
2023-03-28人白細(xì)胞介素6(IL-6)ELISA試劑盒的原理和操作方法-佰利萊生物
2023-12-18產(chǎn)品展示/ Product display
大鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA試劑盒適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類(lèi)型,不需要任何分離步驟,操作十分簡(jiǎn)便、快速,數(shù)分鐘便能得出結(jié)果,酶免疫測(cè)定方法操作時(shí),所有反應(yīng)試劑均在同一體系內(nèi)進(jìn)行。特異性強(qiáng)高效可靠重復(fù)性好,特異性強(qiáng),靈敏度高 準(zhǔn)確穩(wěn)定,免費(fèi)代測(cè)質(zhì)量保證,量大從優(yōu) 僅供科研使用,不能應(yīng)用于臨床
聯(lián)系電話(huà):19121610072
大鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA試劑盒
檢測(cè)方法:酶聯(lián)免疫法
品牌:佰利萊
標(biāo)記物:HRP標(biāo)記物
應(yīng)用:定性/定量/酶活檢測(cè)
貯藏條件:2-8℃
有效期:6個(gè)月
標(biāo)本:血清、血漿、組織液、組織勻漿等
一、組織勻漿的制備
1、取組織塊(0.1g~0.5g)最少可到5~10mg在冰冷的PBS中漂洗,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱(chēng)重,放入5ml的勻漿管中。
2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。
3、勻漿的方式:手工勻漿,機(jī)器勻漿。
① 手工勻漿:左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手將搗桿垂直插入套管中,上下轉(zhuǎn)動(dòng)研磨數(shù)十次(6~8分鐘),充分研碎,制成10%的勻漿液。
② 機(jī)器勻漿:用組織搗碎機(jī)10000~15000 轉(zhuǎn)/分 上下研磨制成10%組織勻漿,也可用內(nèi)切式組織勻漿機(jī)制備(勻漿時(shí)間10秒/次,間隙30秒,連續(xù)3~5次,在冰水中進(jìn)行,可適當(dāng)延長(zhǎng)勻漿時(shí)間),鏡檢觀(guān)察:
4、將制備好的10%勻漿液用普通離心機(jī)或低溫低速離心機(jī)3000轉(zhuǎn)/分左右,離心10~15分鐘,取上清液進(jìn)行測(cè)定.
二、勻漿介質(zhì) 一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸鹽緩沖液(PBS),客戶(hù)可根據(jù)樣本及測(cè)定指標(biāo)的情況自行設(shè)定濃度,目的是保持樣本的等滲環(huán)境。
三、樣本保存:
植物組織樣本暫時(shí)不測(cè)定,可立即低溫凍存,溫度越低越好,中間如反復(fù)凍融,-20℃以下可保 存三個(gè)月,-70℃以下可保存六個(gè)月
試劑準(zhǔn)備:
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
1.標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶:試劑盒提供6管標(biāo)準(zhǔn)品,每管已標(biāo)定濃度,并且凍干。實(shí)驗(yàn)前在每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品管中加入0.5mL稀釋液,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)助其溶解,使其恢復(fù)為每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品管身標(biāo)注的濃度。
2. 20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1:20稀釋?zhuān)?份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
試劑盒自備材料:
1)蒸餾水。
2)加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3)振蕩器及磁力攪拌器等。
大鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA試劑盒
細(xì)胞樣品前處理:
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成50-100萬(wàn)細(xì)胞/管,然后再裂解。
c)對(duì)于組織樣品: 把組織剪切成細(xì)小的碎片。按照每20mg組織加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
2、后處理:
將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的ELISA、Western和免疫沉淀等操作。
免責(zé)聲明:
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書(shū)操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
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